Ein dichotome Schlüssel umfasst unter anderem, ob Bakterien Gram-positiv oder -negativ, Katalase-positiv oder -negativ sind, Nitratenzyme haben und das Enzym Koagulase enthalten. Der Schlüssel ist eine Reihe von Fragen, die, wenn sie vollständig sind, bei der Identifizierung der Bakterien helfen. Jede Frage erfordert das Absolvieren eines bestimmten Tests.
Der Gram-positive oder Gram-negative Test bestimmt, ob Bakterien in der Probe vorhanden sind. Das Material wird gefärbt und zur Untersuchung unter ein Mikroskop gelegt. Eine negative Gram-Färbung zeigt sich normalerweise rosa und zeigt an, dass kein Organismus gefunden wurde. Positive Gram-Färbungen sind normalerweise lila und weisen typischerweise mehr Strukturen auf dem Objektträger auf.
Der Katalase-Test wird verwendet, um Staphylokokken, einen positiven Wert, oder Streptokokken, einen negativen Wert, zu identifizieren. Katalase-positive Bakterien nehmen Sauerstoff auf, während Katalase-negative Bakterien normalerweise anaerob sind.
Der Nitrat-Reduktase-Test bestimmt, ob ein Bakterium eines von zwei Enzymen produziert, Nitrat-Reduktase oder Nitrit-Reduktase. Das Material wird in einem Kulturmedium gezüchtet, das Kaliumnitrat enthält. Wenn sich das Nährmedium rot färbt und Blasen in einem angeschlossenen Durham-Röhrchen erscheinen, ist Stickstoff vorhanden.
Der Koagulase-Test bestimmt, ob die Bakterien Koagulase, ein Blutgerinnungsenzym, enthalten. Der Test wird mit klarem Blutserum durchgeführt. Wenn das Enzym vorhanden ist, trübt sich das Serum ein und verdickt sich.