Zu Louis Pasteurs Familie gehören seine Eltern, ein Bruder, drei Schwestern, seine Frau, ein Sohn und vier Töchter. Von seinen Kindern wurden nur zwei erwachsen und die anderen drei starben an Typhus Kinder. Sein Vater war Gerber nach langer Familientradition.
Pasteur verließ im Alter von 16 Jahren seine Familie, um in Paris zu studieren. Von Heimweh überwältigt kehrte er jedoch weniger als einen Monat später nach Hause zurück, um vor Ort zu studieren. Nach seiner Promotion 1847 an der Ecole Normale in Paris wurde er 1848 Professor an der Universität Straßburg. Dort lernte er Marie Laurent, die Tochter des Universitätsrektors, kennen und heiratete am 29. Mai 1849.
Pasteurs Kinder waren Jeanne, Jean-Baptiste, Cecile, Marie-Louise und Camille. Jeanne starb im Alter von 9, Cecile im Alter von 12 und Camille im Alter von 2. Jean-Baptiste Pasteur heiratete Jeanne Boutroux im Jahr 1874. Tochter Marie-Louise heiratete Rene Vallery-Radot im Jahr 1879 und er schrieb eine von Pasteurs Biografien.
Obwohl er in seiner Familie eine persönliche Tragödie erlitt, legte Pasteurs Arbeit den Grundstein für Impfungen im Kindesalter, die vielen Kindern das Leben gerettet haben. 1879 entwickelte er einen Impfstoff gegen Hühnercholera. 1885 impfte er Joseph Meister, einen Jungen, der von einem tollwütigen Hund gebissen wurde. Es war der Erfolg dieses Impfstoffs, der ihn sofort berühmt machte.