Die Glykolyse erfordert eine anfängliche Energieinvestition von zwei ATP-Molekülen. Im Gesamtprozess der Glykolyse wird ein Glukosemolekül in zwei Pyruvatmoleküle mit einer Nettorendite von zwei ATP-Molekülen zerlegt.
Glykolyse ist ein zehnstufiger Weg, der universell von allen lebenden Organismen durchgeführt wird. Die erste Stufe der Glykolyse, die Energieinvestitionsphase, erfordert eine Glukose und zwei ATP-Moleküle. In dieser Phase wird das ursprüngliche Glucosemolekül in zwei Drei-Kohlenstoff-Moleküle gespalten. Die zweite Stufe der Glykolyse, die Energieabfuhrphase, wandelt die beiden Drei-Kohlenstoff-Moleküle des Glycerinaldehydphosphats in zwei Pyruvat-Moleküle um. In der zweiten Stufe werden vier Moleküle ATP und zwei Moleküle NADH freigesetzt.