Die Jodlösung wirkt als Beizmittel, das den Fleck stärker hervorhebt und der Kristallviolettfarbstoff fester an die Bakterienzelle gebunden wird. Die Zugabe von Jodlösung oder Kaliumchlorid ist der zweite Schritt in der Gram-Färbungsprozess.
Gram-Färbung ist die gebräuchlichste und am weitesten verbreitete Technik, um zwischen gramnegativen und grampositiven Bakterien zu unterscheiden. Dieses Verfahren basiert auf dem Prinzip, dass Bakterien unterschiedlich auf ihre Umgebung reagieren, also auch unterschiedlich reagieren (oder sich färben), was bei der Identifizierung hilft.
Der Prozess der Getreidefärbung umfasst die folgenden Schritte:
Schritt 1
Die Bakterien werden mit dem Kristallviolett-Farbstoff behandelt, dann mit der Jodlösung.
Schritt 2
Nach der Färbung werden der Probe Entfärbungsmittel zugesetzt. Dies entwässert, schrumpft und strafft die Peptidoglycan-Schicht der Bakterien. Die Färbemittel werden aufgrund ihrer dickeren Peptidoglycanschicht in den Zellen grampositiver Bakterien eingeschlossen, während gramnegative Bakterien die Färbung aufgrund ihrer dünnen Schicht nicht festhalten können.
Schritt 3
Die Probe wird mit einer Gegenfärbung rot gefärbt. Die rote Färbung ändert nicht die Farbe der violetten Färbung grampositiver Zellen. Umgekehrt verleiht es gramnegativen Bakterien eine rote Farbe.
