Die Mittleren Kolonien beherbergten eine vielfältige Mischung von Religionen, darunter Quäker, Lutheraner, Presbyterianer, Amish, Kongregationalisten und Juden. Aufgrund verschiedener Kolonialherren in der Region existierten religiöse Traditionen aus vielen europäischen Ländern in das Gebiet. Zu den mittleren Kolonien gehörten New York, New Jersey und Pennsylvania.
Vielleicht war Pennsylvania die toleranteste der mittleren Kolonien. Es wurde von William Penn, einem prominenten Quäker, gegründet, der es sich nicht nur als Zufluchtsort für Quäker, sondern für Menschen aller verfolgten religiösen Minderheiten vorstellte. Pennsylvania zog Kolonisten aus vielen Glaubenstraditionen an, darunter Mennoniten und Amish, die immer noch zur Vielfalt der religiösen Landschaft der Region beitragen. Auch die anderen Kolonien waren vielfältig, aber keine war so aktiv wie Pennsylvania.