Die Hauptereignisse des Anaphase-Stadiums der Mitose sind die Aufspaltung der Schwesterchromatiden und deren Bewegung zu entgegengesetzten Polen innerhalb der Zelle. Der Prozess beginnt, wenn die Zentromere auf jedem Chromosom brechen und sich befreien die beiden Hälften.
Die Zeit, die dieser Vorgang dauert, hängt von der Art des Organismus ab, der die Mitose durchläuft. Die beiden Schwesterchromatiden können sich in einer menschlichen Zelle mit 0,2 bis 0,4 Mikrometer pro Minute bewegen. Spindelfasern und Mikrotubuli steuern die Bewegung der beiden Hälften. Die Mikrotubuli verkürzen sich auf einer Seite der Chromatiden und ziehen sie zu den entsprechenden Polen. Die polaren Mikrotubuli verlängern sich und drücken gleichzeitig. Sobald die Schwesterchromatiden die Spindelpole erreicht haben, beginnen die Mikrotubuli mit Ausnahme der polaren zu verschwinden. Diese beginnen sich zu verlängern und markieren den Übergang zwischen Anaphase und früher Telophase. Spät im Anaphaseprozess beginnen die ersten Anzeichen einer Zytokinese, die zunächst den kontraktilen Ring bildet. Dieser Ring konvergiert langsam, bis er sich trifft und die Zelle in zwei Hälften teilt.
Der Prozess der Anaphase muss ausgelöst werden. Dies geschieht durch gezielte biochemische Veränderungen. Die Proteinkinase löst die Mitose aus und wird durch Proteolyse von Cyclin-Untereinheiten deaktiviert, wodurch das Stadium der Anaphase ausgelöst wird. Es gibt eigentlich zwei Phasen der Anaphase. Anaphase I tritt während der Verkürzung der Mikrotubuli auf. Anaphase II tritt während der Verlängerung der polaren Mikrotubuli und der weiteren Trennung der Spindelpole auf.