Die Hauptbestandteile der Textmarkertinte sind Wasser und Glykollösungsmittel. Etwa 5 Prozent der Tinte sind fluoreszierende Pigmente oder Farbstoffe. Einige Highlighter enthalten auch eine kleine Menge Biozid, um das Wachstum von Pilzen und Bakterien zu verhindern.
Die in gelben Markierungsstiften verwendeten Farbstoffe basieren auf Pyren. Blaue Highlighter enthalten Triphenylmethanfarbstoff. Triphenylmethanfarbstoff in Kombination mit Pyranin ergibt grüne Hervorhebungstinte. Rosa Textmarker enthalten Rhodamin. Lila Textmarker werden mit Rhodamin gemischt mit Triphenylmethan hergestellt. Xanthen in Kombination mit Cumarin ergibt violette Textmarkertinte.
Die chemischen Moleküle in der Textmarkertinte absorbieren ultraviolettes Licht. Dadurch werden die Elektronen im Inneren der Moleküle „anregt“, die dann eine etwas längere Lichtform freisetzen. Diese Wechselwirkung von Licht und Chemikalien wird vom Auge als Fluoreszenz interpretiert.