Die Bodenschicht des O-Horizonts enthält den meisten Humus. Diese Schicht ist die oberste Schicht der meisten Bodenarten. Die O-Horizont-Schicht besteht hauptsächlich aus zersetzter Pflanzenstreu und Humus.
Humus ist eine halblösliche organische Substanz, die aus zersetzten Pilzen und Bakterien entsteht. Humus verleiht der oberen Bodenschicht eine dunkelbraune bis schwarze Farbe. Organismen fügen dem Boden durch Pflanzenstreu und den Zersetzungsprozess Humus und Nährstoffe hinzu. Dieser Prozess beeinflusst die Struktur und Fruchtbarkeit des Bodens. Bodenorganismen wie Regenwürmer, Käfer und Termiten verteilen den Humus in den unter der Bodenoberfläche befindlichen Mineralstoffen vertikal um.