C18-Säulen werden in der Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) verwendet, um Komponenten einer Mischung löslicher Chemikalien nach ihren Polaritätsunterschieden zu trennen. C18-Säulen haben Ketten aus 18 Kohlenstoffatomen, die an Silicaperlen an der Säulenwand befestigt sind.
C18-Säulen werden in der Umkehrphasenchromatographie verwendet, bei der die Umgebung der Säule unpolar und die mobile Phase (die Flüssigkeit, in der die Chemikalien gelöst sind) polar ist. C18 ist die am häufigsten verwendete Umkehrphasensäule und Umkehrphasenchromatographie ist die am häufigsten verwendete HPLC-Technik. Andere gängige Typen von Reversed-Phase-Säulen sind C8, Phenyl und reines Siliziumdioxid ohne andere gebundene chemische Gruppen.