Der periplasmatische Raum ist der Bereich zwischen zwei durchlässigen Grenzen. Der periplasmatische Raum befindet sich bei gramnegativen Bakterien zwischen der inneren und der äußeren Membran, laut UniProt. Bei Gram-positiven Bakterien ist der periplasmatische Raum kleiner und befindet sich zwischen der äußeren Polymerhülle und der inneren Membran.
Das Periplasma enthält Proteine und Wasser und kann mit Zytoplasma verglichen werden. Im Periplasma vorhandene kleine Moleküle unterscheiden sich jedoch vom Zytoplasma, da die Membranen den freien Austausch zwischen den beiden Kompartimenten verhindern. Proteine, die im Periplasma vorhanden sind, unterscheiden sich stark vom Zytoplasma und werden während der Translation durch spezifische Signale gesteuert. Periplasmatische Enzyme spielen eine Rolle bei der Beweglichkeit, beim Abbau anderer Verbindungen und beim Transport.