Die Hoden, die sich im Hodensack befinden, produzieren und sezernieren Testosteron. Obwohl es eine geringere Rolle für ihre reproduktive Gesundheit spielt, produzieren und sezernieren auch die Eierstöcke von Frauen kleine Mengen Testosteron. Bei beiden Geschlechtern bestimmen der Hypothalamus und die Hypophyse, wie viel Testosteron produziert wird.
Kleine Mengen dieses Hormons werden auch von den Nebennieren ausgeschüttet. Testosteron ist das primäre Androgen bei Männern, und ein erhöhter Spiegel dieses Hormons während der Pubertät führt zur Entwicklung von Gesichtsbehaarung, erhöhter Körpergröße und Muskelmasse, einer tieferen Stimme und einem Adamsapfel. Testosteron ist auch für die gesunde Entwicklung des männlichen Fortpflanzungssystems unerlässlich.
