Restriktionskartierung ist der Prozess, bei dem mithilfe von Restriktionsenzymen strukturelle Informationen über ein DNA-Stück erhalten werden. Es wird verwendet, um ein unbekanntes DNA-Segment zu kartieren, indem es in Stücke zerlegt und die Positionen identifiziert werden der Haltepunkte.
Diese Methode beruht auf der Verwendung von Proteinen, die als Restriktionsenzyme bezeichnet werden und DNA-Moleküle an kurzen, spezifischen Sequenzen, den sogenannten Restriktionsstellen, schneiden oder verdauen können. Nachdem ein DNA-Segment mit einem Restriktionsenzym verdaut wurde, können die resultierenden Fragmente mit einer Labormethode namens Gelelektrophorese untersucht werden. Dies wird verwendet, um DNA-Stücke nach ihrer Größe zu trennen.