Ein Citrat-Test bestimmt, ob eine Mikrobe wachsen kann, indem sie Citrat als einzige Energie- und Kohlenstoffquelle verwendet. Wenn die Mikrobe auf Simmons-Citrat-Agar wächst, besteht sie den Test.
Die Verwendung von Citrat führt zu einem Anstieg des pH-Werts, da sich alkalische Nebenprodukte in der Mikrobe anreichern, so die Hersteller von VirtualUnknown Microbiology. Als Medium wird Simmons-Citrat-Schrägagar verwendet. Es enthält Natriumcitrat und Mineralsalze, die Kohlenstoff liefern, und es enthält Ammoniumphosphat als Stickstoffquelle. Ein für den Test verwendeter pH-Indikator ist Bromthymolblau. Bei neutralem pH-Wert wird die Farbe grün, gelb bedeutet, dass der pH-Wert sauer ist und blau entspricht einem alkalischen pH-Wert.