Was ist der Zweck von Salz bei der DNA-Extraktion?

Während der Extraktion von Desoxyribonukleinsäure oder DNA werden typischerweise Salzverbindungen wie Natriumacetat und Ammoniumacetat hinzugefügt, um die Entfernung von DNA-assoziierten Proteinen zu unterstützen. Eine andere Art von Salzverbindung namens Natrium Chlorid oder NaCl hilft bei der Verfestigung und Sichtbarmachung der DNA. Beim Mischen in einer Alkohollösung bildet die Natriumkomponente von NaCl eine Schutzbarriere um die negativ geladenen DNA-Phosphatenden, sodass sie näher an die Extraktion aus der Lösung heranrücken können.

DNA-Extraktion ist der Prozess, bei dem reine DNA aus einer Probe gewonnen wird, entweder aus lebenden oder nicht lebenden Zellen, wie sie in Viren vorkommen. Diese Technik wird häufig im medizinischen Bereich verwendet, wo die Früherkennung von Krankheiten und Störungen die Überlebensraten betroffener Personen signifikant erhöht.

Die Methode erfordert zunächst die Lyse von Zellen, die die zu extrahierende DNA enthalten. Die Zellen zerfallen, indem die Probe Ultraschallschwingungen ausgesetzt wird oder durch Kugelschlagen. Die Probe wird mit Salz versetzt, das in einer Lösung von Phenol-Chloroform zentrifugiert wird. Die zugehörigen Proteinmoleküle werden dann herausgezogen. Die nach dem Entfernen der Proteine ​​verbleibende DNA wird mit einer Alkohollösung, typischerweise kaltem Isopropanol oder Ethanol, vermischt. Die Lösung wird zentrifugiert und DNA, die sich nicht in Alkohol löst, wird ausgefällt und extrahiert. Um die DNA-Ausbeute zu erhöhen, muss der gesamte Prozess in einer kalten Umgebung durchgeführt werden.