Wie alle Insekten hat die Schwarze Witwe eine Vielzahl von Raubtieren, darunter den Schlammfleck und die Gottesanbeterin. Gelegentlich fressen auch Wespen diese giftigen Spinnen.
Während sie von größeren und mächtigeren Raubtieren gejagt werden, ernähren sich Schwarze Witwenspinnen auch von einer Reihe von Kreaturen. Ihre Beute reicht von kleinen Insekten wie Heuschrecken und Raupen bis hin zu größeren Lebewesen wie Mäusen. Gelegentlich greifen sie auch auf Kannibalismus zurück. Sobald ihre Beute in einem Netz feststeckt, kann eine Schwarze Witwe der Beute Enzyme injizieren. Diese Enzyme zersetzen die Beute in einen flüssigen Zustand, was der Spinne den Verzehr erleichtert.